Novel Coronavirus: 精細に可視化! belle visualisation ! Feine Visualisierung! Fine Visualization! 新型冠狀病毒:精細可視化!

Novel Coronavirus: 精細に可視化!
belle visualisation !
Feine Visualisierung!
Fine Visualization!
新型冠狀病毒:精細可視化!

ー花王、染色ウイルス粒子を調製ー

花王:

ー新型コロナウイルスに結合するVHH抗体ー

「高輝度蛍光タンパク質を連結した融合タンパク質」を用いて、

「新型コロナウイルスの診断への応用」を検討してきた。

染色ウイルス粒子を調製:

「環境中のウイルスの簡便な可視化技術」を開発した。

新型コロナウイルス:

  • パラホルムアルデヒドで処理する。
  • 感染能をなくした上でウイルスRNAを染色する。
  • SYTO82、Sタンパク質に結合するKikG融合VHH抗体を加える。

染色ウイルス粒子を調製する。

繊維にウイルスが付着:

作製したウイルス粒子をポリエステル布に滴下して、繊維にウイルスを付着させた。

蛍光顕微鏡で観察:

蛍光顕微鏡で観察した。

繊維上に、

ウイルス由来の蛍光(SYTO82)と、KikG融合VHH抗体由来の蛍光が、
同じ位置に検出された。

ウイルス粒子の可視化:

この結果は、

繊維に付着したウイルス粒子が、KikG融合VHH抗体由来の高輝度な蛍光で、

可視化されたことを示している。

衣料用洗剤で洗たく:

ウイルスが付着した布を衣料用洗剤で洗たくした。

  • KikG-VHH融合タンパク質由来の蛍光が、
  • 繊維上から顕著に減少することを確認。

今回の試験:

「繊維上でもウイルスを可視化できる可能性」が示された。

これまでは、電子顕微鏡などでしか確認できなかった。

環境中のウイルス粒子:

「高輝度・蛍光タンパク質」と「高結合性能を持つVHH抗体」を、

結合させることで、ウイルス粒子を簡便に観察できる。

Forbes JAPAN 公式サイト

https://forbesjapan.com/articles/detail

Nouveau coronavirus : belle visualisation !

– Kao prépare des particules virales colorées –

Kaô :

-Anticorps VHH qui se lie au nouveau coronavirus-

En utilisant “une protéine de fusion liée à une protéine fluorescente de haute intensité”,

Nous étudions “l’application au diagnostic du nouveau coronavirus”.

Préparez les particules virales colorées :

Nous avons développé une technologie simple de visualisation des virus dans l’environnement.

Coronavirus nouveau:

Traiter avec du paraformaldéhyde.
L’ARN viral est coloré après élimination de l’infectiosité.
Ajouter SYTO82, un anticorps VHH fusionné avec KikG qui se lie à la protéine S.
Préparer les particules virales colorées.

Virus attaché aux textiles :

Les particules virales préparées ont été déposées sur un tissu en polyester pour attacher le virus à la fibre.

Observé au microscope à fluorescence :

Observé au microscope à fluorescence.

sur la fibre

Fluorescence dérivée du virus (SYTO82) et fluorescence dérivée de l’anticorps VHH fusionné avec KikG
détecté au même endroit.

Visualisation des particules virales :

Ce résultat est

Les particules virales attachées à la fibre sont brillamment fluorescentes à partir de l’anticorps VHH fusionné avec KikG,

Cela montre qu’il est visualisé.

Laver avec un détergent à lessive :

J’ai lavé le chiffon infecté par le virus avec un détergent à lessive.

Fluorescence dérivée de la protéine de fusion KikG-VHH
Il est confirmé qu’elle diminue significativement à partir de la fibre.
Ce test:

“Possibilité de visualiser des virus même sur des textiles” a été démontrée.

Jusqu’à présent, cela ne pouvait être confirmé qu’au microscope électronique.

Particules virales dans l’environnement :

“Protéine à haute luminosité/fluorescente” et “anticorps VHH avec une capacité de liaison élevée”

En se liant, les particules virales peuvent être facilement observées.

Forbes JAPON Site officiel

Novel Coronavirus: Feine Visualisierung!

– Kao bereitet gefärbte Viruspartikel vor –

Kao:

-VHH-Antikörper, der an das neuartige Coronavirus bindet-

Verwendung “eines Fusionsproteins, das mit einem hochintensiven fluoreszierenden Protein verbunden ist”,

Wir haben die „Anwendung zur Diagnose des neuen Coronavirus“ untersucht.

Bereiten Sie gefärbte Viruspartikel vor:

Wir haben eine einfache Visualisierungstechnologie für Viren in der Umgebung entwickelt.

Neuartiges Coronavirus:

Mit Paraformaldehyd behandeln.
Virale RNA wird gefärbt, nachdem die Infektiosität eliminiert wurde.
Fügen Sie SYTO82 hinzu, einen KikG-fusionierten VHH-Antikörper, der an das S-Protein bindet.
Bereiten Sie gefärbte Viruspartikel vor.

An Textilien haftende Viren:

Die hergestellten Viruspartikel wurden auf ein Polyestertuch getropft, um das Virus an der Faser zu befestigen.

Unter einem Fluoreszenzmikroskop beobachtet:

Beobachtet mit einem Fluoreszenzmikroskop.

auf der Faser

Virus-abgeleitete Fluoreszenz (SYTO82) und KikG-fusionierte VHH-Antikörper-abgeleitete Fluoreszenz
an der gleichen Stelle erkannt.

Visualisierung von Viruspartikeln:

Dieses Ergebnis ist

An der Faser anhaftende Viruspartikel fluoreszieren hell vom KikG-fusionierten VHH-Antikörper,

Es zeigt, dass es visualisiert wird.

Mit Waschmittel waschen:

Ich habe das virusbehaftete Tuch mit Waschmittel gewaschen.

Fluoreszenz stammt von KikG-VHH-Fusionsprotein
Es wird bestätigt, dass es von der Faser signifikant abnimmt.
Dieser Test:

„Möglichkeit Viren auch auf Textilien zu visualisieren“ wurde gezeigt.

Bisher konnte es nur mit einem Elektronenmikroskop bestätigt werden.

Viruspartikel in der Umwelt:

„High-Brightness/Fluoreszenz-Protein“ und „VHH-Antikörper mit hoher Bindungsfähigkeit“

Durch die Bindung können Viruspartikel leicht beobachtet werden.

Offizielle Seite von Forbes JAPAN

Kao | A Highly Photostable Fluorescent Protein

– Technology That Allows For Quantitative Observation of Cellular Microstructures and Viruses –

A joint research group consisting of researchers from

the Laboratory for Cell Function Dynamics of the RIKEN Center for Brain Science

the Biotechnological Optics Research Team of the RIKEN Center for Advanced Photonics;

the Asamushi Research Center for Marine Biology, Graduate School of Life Sciences, Tohoku University;

the Ōmura Satoshi Memorial Institute, Kitasato University;

the Safety Science Research Laboratories,

Kao Corporation,

promotes sustainable bioimaging by utilizing a jellyfish-derived green fluorescent protein StayGold, which is bright and exhibits minimal fading.

StayGold improves
spatiotemporal resolution and dramatically extends the observation period.

This finding offers
a new and powerful tool for the bioimaging community,

in which most experimenters encounter the challenging issue of photobleaching[1] of fluorescent proteins.

On the basis of gene expression[2] analysis of the jellyfish Cytaeis uchidae[3] done by

researchers from Tohoku University, researchers from RIKEN created StayGold, a bright fluorescent protein variant with the unique property of minimal photobleaching,

through their molecular cloning and mutagenesis studies on a wild-type fluorescent protein.

Fluorescent labelling of organelles such as

the endoplasmic reticulum, mitochondria,
and microtubules with StayGold

has revealed dynamic structural changes that could not be observed previously due to the photobleaching of conventional fluorescent proteins.

In addition, StayGold was molecularly linked to the anti-Spike VHH antibody[4]
developed by researchers from

Kitasato University and Kao Corporation to visualize the process of virion maturation in SARS-CoV-2-infected cells,

which is appealing to scientists in medicine who are working furiously to develop ways to reliably detect SARS-CoV-2 and other infectious viruses.

These findings were reported in Nature Biotechnology Online (published on April 25).

https://www.kao.com/global/en/news/rd/2022/20220708-002/

A highly photostable and bright green fluorescent protein | Nature Biotechnology

https://www.nature.com/articles/s41587-022-01278-2